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微生物培養(yǎng)基原料-瓊脂簡介
瓊脂又名瓊膠,俗稱洋菜、凍粉,英文名稱為Agar。瓊脂系從石花菜、江籬及紫菜等紅藻類植物中提取而制成的一種藻膠,它是由瓊脂糖和瓊膠質(zhì)組成的長鏈多糖復(fù)合體,其化學(xué)成分是聚半乳糖硫酸酯,屬于膠體物質(zhì)。瓊脂是一種凝固劑,除部分用于制備微生物固體和半固體培養(yǎng)基、生化試劑的配制外,作為食品添加劑,廣泛用于食品生產(chǎn)領(lǐng)域。
瓊脂是迄今為止理想的固體培養(yǎng)基中良好的凝固劑。瓊脂作為培養(yǎng)基的凝固劑極少受細菌所產(chǎn)生酶的影響,耐加壓滅菌。當(dāng)瓊脂與水混合加熱至100℃或更高時,可形成半透明或透明膠狀物,待冷至40℃~45℃,可形成凝膠狀,加上其他營養(yǎng)物質(zhì),可制成固體培養(yǎng)基,是微生物學(xué)、遺產(chǎn)學(xué)、細胞學(xué)和組織培養(yǎng)等實驗室*的基本實驗材料。
瓊脂凝膠強度的高低決定了培養(yǎng)基配方中瓊脂用量的多少,一般粉狀瓊脂在配制固體培養(yǎng)基用量約為1%~1.5%。不同廠商及不同批號的瓊脂凝膠強度存在著明顯的差異,凝膠強度高的瓊脂在生產(chǎn)制造培養(yǎng)基時用量就應(yīng)減少,反之瓊脂含量就應(yīng)增加。使用不同凝膠強度的瓊脂粉制備培養(yǎng)基加入的用量是*不一樣的。因此,我們建議使用凝膠強度來表示培養(yǎng)基的硬度。
培養(yǎng)基的合適凝膠強度一般在400~700 g/cm2范圍之間,具體不同品種培養(yǎng)基的合適凝膠強度則需要大量實驗以確定。過少的加入瓊脂量會造成培養(yǎng)基不易凝固,劃線接種細菌時易劃破;過多的加入瓊脂量不僅造成了不必要的浪費而且還會造成培養(yǎng)基過硬,直接影響微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用。酸性條件下瓊脂易降解,在pH偏酸的培養(yǎng)基中瓊脂加入量過少易導(dǎo)致凝膠強度下降而影響產(chǎn)品質(zhì)量。